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中国兽医科学杂志

杂志介绍

中国兽医科学杂志是由中华人民共和国农业农村部主管,中国农业科学院兰州兽医研究所主办的一本北大期刊。

中国兽医科学杂志创刊于1971,发行周期为月刊,杂志类别为农业类。

  • 猪嵴病毒和猪星状病毒及猪环曲病毒多重RT-PCR检测方法的建立及临床应用

    关键词: 猪嵴病毒  猪星状病毒  猪环曲病毒  

    根据猪嵴病毒(PKV)3D基因、猪星状病毒(PAstV)ORF2基因和猪环曲病毒(PToV)M基因的序列,设计了3对引物,通过反应体系和条件的优化,首次建立了检测猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的多重RT-PCR。本研究建立的多重RT-PCR对PKV、PAstV和PToV的最低检出限分别为1.51×10^4、1.19×10^3、1.26×10^4 copies/μL,同时也具有较强的特异性和良好的重...

  • 猪带绦虫缺氧诱导因子-1的原核表达和真核表达及其多克隆抗体的制备

    关键词: 猪带绦虫  原核表达  真核表达  多克隆抗体  

    为了表达猪带绦虫的缺氧诱导因子-1(HIF-1)并制备其特异性抗体,根据本课题组对猪带绦虫全基因组测序获得的HIF-1基因序列设计了1对特异性引物,以提取的猪带绦虫的总RNA为模板,通过RTPCR获得猪带绦虫HIF-1基因。将该基因定向克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,并用IPTG诱导表达,对表达产物进行SD...

  • 猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽的筛选及其抗病毒作用

    关键词: 噬菌体展示  猪流行性腹泻病毒  m蛋白  多肽  抗病毒作用  

    把成功构建的猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白的阳性重组质粒pET-32a(+)-M在大肠杆菌表达系统中进行诱导表达。以表达纯化的M蛋白作为靶蛋白,利用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行筛选,4轮淘选后,挑选出了10个与PEDV及M蛋白特异性结合力高的噬菌体单克隆,序列测定后推导的氨基酸序列分别为AGWYCTEVLCV、AYCTRHVCYLDN,多肽被命名为M2、M9。就...

  • 伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株的实时荧光定量PCR鉴别方法的建立

    关键词: 伪狂犬病病毒  野毒株  疫苗株  实时荧光定量pcr  鉴别  

    针对伪狂犬病病毒疫苗株基因组缺失的3.5kb片段,设计3套引物和探针,并用标准的伪狂犬病病毒野毒株和疫苗毒株进行测试,建立了一种新的快速鉴别伪狂犬病病毒野毒株和疫苗株的实时荧光定量PCR方法。该方法的检测极限可达10copies/μL,并与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒等不存在交叉反应现象,批内和批间重复性试验的变...

  • 亲环蛋白A对日本脑炎病毒体外复制能力的影响

    关键词: 日本脑炎病毒  亲环蛋白a  荧光定量  

    为研究亲环蛋白A(CyPA)对日本脑炎病毒(JEV)体外增殖能力的影响,构建了真核重组质粒pcDNA3.1-CyPA,并将其转染至BHK21细胞内,接种JEV后于不同时间点收集细胞上清液,采用荧光定量RT-PCR检测各时间点的病毒含量,绘制体外增殖曲线;同时检测不同质量浓度的CyPA原核表达蛋白对JEV复制的影响。结果显示,加入CyPA原核表达蛋白组的上清中病毒含量均...

  • 鸡β防御素2在毕赤酵母中的组成型表达及其发酵条件的优化

    关键词: 巴斯德毕赤酵母  组成型表达  响应面法优化  

    合成鸡β防御素2(AvBD2)成熟肽基因,构建重组质粒pGHK-AvBD2;将其电转化至毕赤酵母GS115;Tricine-SDS-PAGE和Western-blot检测表达产物,琼脂扩散法测定产物的抑菌活性,并测定产物的溶血活性;响应面法优化接种量、装液量和发酵温度。Tricine-SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,在5.8ku位置出现目的蛋白质条带;抑菌活性检测表明,表达产物对粪肠...

  • 猪流感病毒M2多肽抗体间接ELISA检测方法的建立

    关键词: 流感病毒  猪流感病毒  m2蛋白多肽  间接elisa  

    为建立快速检测猪流感病毒抗体的血清学方法,利用合成的甲型流感病毒M2蛋白多肽作为包被抗原,建立了检测猪流感病毒血清抗体的间接ELISA,并对各种检测条件进行了优化。结果显示,优化后确定的抗原最适包被量为250ng/孔,血清最佳稀释度为1∶100,酶标二抗最佳稀释度为1∶4 000。在优化条件下,阴阳性临界值的判定标准为0.249。用建立的间接ELISA对CS...

  • 鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立及应用

    关键词: 鸡毒支原体  套式pcr  mgc2  

    为了建立鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)套式PCR检测方法并初步将其应用于临床检测,对目前常用的5对引物(gapA-F/gapA-R、16SrRNA-F/16SrRNA-R、mgc2-F1/mgc2-R1、mgc2-F2/mgc2-R2、LP-F/LP-R)检测MG的灵敏度进行了比较,从中选出灵敏度较强的引物建立套式PCR检测方法,同时进行了特异性、敏感性及临床检测试验。结果表明,以mgc2基...

  • Bac-to-Bac系统双表达蛋白IBDV VP2-IL-18免疫原性的研究

    关键词: 传染性法氏囊病病毒  鸡  vp2  免疫原性  

    把用Bac-to-Bac系统单表达或双表达的蛋白IL-18、传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2和IBDV VP2-IL-18与IBD疫苗同时腿部肌肉多点注射免疫14日龄SPF鸡,14d后加强免疫1次;免疫前、后均采血检测外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞数量和ELISA抗体效价。二免后第21天用vvIBDV-GX8/99毒株进行攻毒。结果显示,VP2-IL-18、VP2+IL-18、IL-18+IBD疫苗、VP2分别免...

  • 猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒双重RT-LAMP检测方法的建立与应用

    关键词: 猪瘟病毒  猪繁殖与呼吸综合征病毒  检测  

    根据GenBank中猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的保守序列各设计一套LAMP引物,在同一体系中进行RT-LAMP扩增,通过对体系内引物浓度及反应温度等进行优化,建立了可在63℃恒温下对CSFV和PRRSV进行同步检测的LAMP方法,并进行了敏感性和特异性试验。结果显示,该方法的灵敏度与荧光定量RT-PCR相当,与常规RT-PCR相比高10倍;用该方...

  • 鼠伤寒沙门菌crp基因缺失株SL1344Δcrp生物学特性的测定

    关键词: 鼠伤寒沙门菌  crp基因  运动性  生物被膜  

    为研究crp基因缺失后引起的减毒机制,本试验对鼠伤寒沙门菌crp基因缺失株SL1344Δcrp的有关生物学特性进行了测定。结果显示,与亲本菌株相比,缺失株失去了运动能力;SL1344Δcrp不表达纤维素和菌毛,不能形成生物被膜;SL1344Δcrp对细胞增殖和细胞毒性的影响均弱于亲本菌株;crp基因缺失后缺失株对上皮细胞的黏附和侵入能力与亲本菌株相比无明显差异。...

  • 鸡PrP基因真核表达载体的构建及其在毕赤酵母GS115中的表达

    关键词: 鸡朊蛋白  ppic9k  毕赤酵母gs115  真核表达  

    为构建鸡PrP基因的真核表达载体,并通过毕赤酵母表达系统获得鸡朊蛋白(ChPrP),根据毕赤酵母GS115的密码子偏好性、G+C含量等特点对目的基因PrP(25~248)进行密码子优化与基因合成,同时以特异性引物扩增获得天然未经密码子优化的目的片段,之后将两种目的片段分别连接于pPIC9K表达载体并转化至毕赤酵母GS115中,经PCR,选择培养基MM、MD方法鉴...

  • 趋化因子配体5及趋化因子受体5在人工感染多杀性巴氏杆菌的鸡脾内的动态表达

    关键词: 多杀性巴氏杆菌  鸡  趋化因子配体5  趋化因子受体5  肝  脾  

    给20日龄伊莎褐蛋鸡皮下注射多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)建立了禽霍乱动物模型,以感染后第4、12、24、48、120小时为时间点采样,运用病理学技术和免疫组织化学方法,研究被感染鸡的肝、脾病理学变化及脾内趋化因子配体(CCL5)及趋化因子受体5(CCR5)的动态表达。结果显示,雏鸡感染多杀性巴氏杆菌后发现明显局灶性肝坏死和脾内淋巴...

  • 猪β干扰素真核表达载体pEGFP-C1-IFN-β的构建及在CHO细胞中的表达

    关键词: 真核表达  表达产物  免疫活性  

    为了获得重组猪β干扰素,并实现其在CHO-K1细胞中的表达,根据GenBank中登录的IFN(JN391525.1)核苷酸序列,设计并合成目的基因的检测引物,并将合成的目的基因克隆至pEGFP-C1载体上,构建重组真核表达质粒pEGFP-C1-IFN-β,通过PCR、酶切鉴定及测序确认,将重组质粒转染到CHO-K1细胞中。经SDS-PAGE检测,获得了约25ku的表达产物,与预期的猪β干扰素蛋白...

  • 大肠杆菌对体外培养的奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1和NF-κB及TLR4表达的影响

    关键词: 大肠杆菌  奶牛乳腺成纤维细胞  tlr4  

    为研究大肠杆菌对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)TGF-β1表达的影响以及对其信号转导通路Toll样受体4(TLR4)的表达和核转录因子κB(NF-κB)活化的影响,采用热灭活的不同浓度大肠杆菌菌液(0、1×10^5、1×10^6、1×10^8 CFU/mL)作用于奶牛乳腺成纤维细胞,分别于不同时间点(作用后第6、12、24、48小时)运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测TGF-β1和T...

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