中国兽医科学杂志

牛传染性鼻气管炎病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立

关键词: 牛传染性鼻气管炎病毒  实时荧光定量pcr  检测方法  

为了检测牛传染性鼻气管炎病毒,本研究建立了牛传染性鼻气管炎病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。通过设计特异性引物扩增病毒基因,将扩增的目的片段(119 bp)连接到pMD19-T载体中,构建重组质粒。将重组质粒作为阳性标准品,用于SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立。结果显示,特异性引物扩增的目的片段约为119 bp,符合预期的大小,...

PDCoV和PEAV二重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

关键词: 猪德尔塔冠状病毒  

猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪肠道α冠状病毒(PEAV)是两种新发现的猪传染性冠状病毒,临床上均以腹泻症状为主,症状相似,临床上难以快速诊断。为建立一种快速、准确区分PDCoV和PEAV的二重RT-PCR方法,本研究根据PDCoV和PEAV N基因序列,分别设计2对特异性引物,以阳性质粒为模板,对二重RT-PCR反应条件进行优化,并进行特异性、敏感性试验。结果显示,所...

高致病性H7N9流感病毒荧光RT-PCR检测方法的建立

关键词: 高致病性  h7n9  流感病毒  检测方法  

2017年初在中国出现的H7N9流感病毒变异株表现出对禽高致病性的特征,根据高致病性H7N9流感病毒(HP-H7N9)的HA基因序列,设计1组HP-H7N9特异性的引物和探针,在对反应体系进行优化的基础上,建立了HP-H7N9的荧光RT-PCR检测方法并进行了特异性、敏感性和重复性试验,制作了标准曲线。结果显示,本方法只对HP-H7N9特异性扩增,而对低致病性H7N9病毒(LP-H7...

A型塞内卡病毒VP2蛋白间接ELISA检测方法的建立

关键词: a型塞内卡病毒  抗体  间接elisa  

为建立一种检测塞内卡病毒VP2蛋白的间接ELISA方法,本试验将A型塞内卡病毒(SVA)VP2蛋白作为抗原包被酶标板,采用棋盘式方法优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量,同时对间接ELISA方法的其他反应条件进行了筛选。结果显示,VP2蛋白包被量为2μg/m L(1∶1000稀释);用2%BSA封闭液稀释标准阳性血清为1∶20;二抗做1∶5000稀释;TMB底物显色液室温避光显...

传染性法氏囊病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

关键词: 传染性法氏囊病病毒  抗体  间接elisa  

为了建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法,本研究首先将VP2基因分3段(部分序列重叠),分别为VP2(1~600)、VP2(376~975)和VP2(751~1350),并根据大肠杆菌对密码子的偏爱性进行优化,将优化的3个VP2基因片段分别克隆于原核表达载体pET28a(+)中,转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western-blot,结果3个重...

口疮病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用

关键词: 山羊  口疮病毒  重组b2l蛋白  原核表达  间接elisa  

为建立检测口疮病毒(orf virus,ORFV)抗体的间接ELISA方法,原核表达口疮病毒B2L蛋白与6×组氨酸标签的重组蛋白;对纯化复性后的重组B2L蛋白进行Western-blot鉴定;用复性后的重组B2L蛋白作为包被抗原,优化反应条件,建立检测ORFV抗体的间接ELISA,并进行特异性、灵敏度和重复性评价,最后应用所建立的间接ELISA对来自四川部分地区的384份山羊血清样品...

旋毛虫IFN-γ诱导的溶酶体硫醇还原酶对大鼠外周血单个核细胞功能的影响

关键词: 旋毛虫  外周血单个核细胞  免疫功能  

适合鸭瘟病毒弱毒增殖的MHC单倍型鸭胚肝间充质干细胞的建立

关键词: 鸭瘟病毒  鸭胚肝间充质干细胞  主要组织相容性复合体单倍型  

为了建立适于鸭瘟病毒(DPV)弱毒增殖的细胞系,利用4个主要组织相容性复合体(MHC)单倍型鸭品系,体外分离鸭胚肝细胞,在干细胞因子、白细胞抑制因子和成纤维细胞生长因子诱导下,获得鸭胚肝间充质干细胞(DuLMSC)。接种DPV疫苗株C-KCE后,结果显示:F1~F10代均能稳定出现CPE;将F10病毒接种细胞24 h后,通过扫描电镜在胞质、胞核及细胞间隙均能够观察到...

2017—2019年猪流行性腹泻病毒广西流行毒株遗传多样性分析

关键词: 猪流行性腹泻病毒  s基因  m基因  n基因  遗传多样性  

为掌握广西猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株的遗传变异情况,本研究对2017-2019年从广西各地采集的腹泻样品,应用RT-PCR方法进行检测,并随机选取部分PEDV阳性样品进行S、M、N基因的扩增、测序和分析。结果显示,共获得PEDV S基因序列23株、M基因和N基因序列各25株。同源性分析显示,广西流行毒株间核苷酸和氨基酸序列同源性在S基因为90.6%~100%和89...

1株抗须癣毛癣菌枯草芽孢菌的鉴定

关键词: 须癣毛癣菌  拮抗  枯草芽孢杆菌  

为了探讨抗须癣毛癣菌感染新的治疗途径,从患须癣毛癣菌病兔自然恢复皮肤分离了1株细菌,经16S rDNA基因比对,并结合菌落形态进行了鉴定,通过体内外试验测定其对须癣毛癣菌的拮抗作用。结果显示,分离株能在营养琼脂培养基生长,菌落为皱褶圆形,菌体呈杆状,革兰染色阳性,基因序列分析与GenBank中的枯草芽孢杆菌相似率为99.8%,该分离株被鉴定为枯草...

牛结节性皮肤病防控技术研究现状及其策略

关键词: 牛结节性皮肤病  山羊痘病毒属  诊断技术  减毒活疫苗  防控技术  

2019年8月我国新疆伊犁地区首次爆发牛结节性皮肤病,为做好该病的防控工作,防止外来疫情扩散蔓延到我国内地,现将该病防控的诊断检测技术、疫苗研发状况以及我国的策略进行概括介绍,为有效控制、净化和根除该病提供指导。

非洲猪瘟病毒感染免疫反应的研究进展

关键词: 先天性免疫  获得性免疫  免疫反应  

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种危害全球养猪业的灾难性疾病,临床上以急性、热性、出血性、高发病率和高死亡率为特征。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,也是我国必须上报的一类动物疫病。自上世纪二十年代出现以来,有关非洲猪瘟病毒的病原特性、流行特点以及免疫应答等多个方面的研究虽然已经开展,但是我们对其仍然...

人工感染禽腺病毒血清4型对鹅天然免疫反应的影响

关键词: 禽腺病毒血清4型  toll样受体  细胞因子  天然免疫反应  

重组猪源CD40L体外诱导猪肺泡巨噬细胞IL-1β和TNF-α的分泌

关键词: 重组猪源cd40l  猪肺泡巨噬细胞  

本试验旨在研究重组猪源CD40L蛋白(recombinant porcine CD40L,rpCD40L)的生物学活性。利用Alexa Fluor 488标记rpCD40L后,在体外与CD40+原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAMs)作用,荧光显微镜观察rpCD40L与PAMs的结合,并通过qPCR、ELISA检测作用12 h和24 h后PAMs IL-1β和TNF-αm RNA与蛋白水平的变化。结果显示,荧光标记的rpCD...

酮洛芬注射液在乳牛体内的残留消除研究

关键词: 酮洛芬  牛乳  残留  

为建立牛乳中酮洛芬的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,牛乳样品经甲醇提取,C18色谱柱分离,采用正离子模式,多反应监测,内标法定量。结果表明,牛乳中酮洛芬的检出限为1μg/kg,定量限为5μg/kg,在5~200μg/kg范围内线性关系良好,相关系数大于0.99。在25~100μg/kg添加水平的回收率为93.3%~107.5%,批内、批间相对标准偏差分别为1.72%~5.46%、1.13...

利用Box-Behnken效应面法优化氟苯尼考纳米混悬剂处方

关键词: 氟苯尼考  纳米混悬剂  

为了优化制备氟苯尼考纳米混悬剂,使用介质研磨法制备氟苯尼考纳米混悬剂,以粒径、多分散系数为评价指标,采用Box-Behnken设计-效应面法评价氟苯尼考纳米混悬剂的处方,并进行验证,用HPLC法测定氟苯尼考纳米混悬剂的含量。结果显示,最优处方为药物浓度为10.12%、HPMC浓度为11.88 mg/m L、SDS浓度为1 mg/m L。制得的氟苯尼考纳米混悬剂的粒径、多...

列当的安全性评价试验

关键词: 列当  安全性试验  心脏毒性  肝毒性  肾毒性  

为进一步确定列当(Orobanche cumana)的实际效用以及是否可以在成为肉苁蓉的替代品方面有其相应的价值,对小鼠进行半数致死量测定和最大给药量测定的急性毒性试验、SD大鼠进行30 d灌胃的亚慢性毒性试验,观察列当水煎液的毒性作用。急性毒性试验结果表明,当列当水煎液的最大给药剂量为40 g/kg时,小鼠并无不适反应,体征一切正常,7 d内所有小鼠无死...

甘青虎耳草黄酮对H22肝癌小鼠抗肿瘤作用的研究

关键词: 甘青虎耳草  黄酮  肝癌细胞  抗肿瘤  

《中国兽医科学》征稿合约

关键词: 兽医科学  中国农业科学院  临床兽医学  预防兽医学  中国学术期刊  研究论著  基础兽医学  学术论文  

尊敬的广大作者:《中国兽医科学》为学术性期刊,设有预防兽医学、基础兽医学、临床兽医学共3个栏目。主要刊登具有较高学术水平的兽医科学研究论著和相关学术论文。1约定1.1中国农业科学院兰州兽医研究所主办的《中国兽医科学》已加入《中国学术期刊(光盘版)CAJ-CD》、《中国学术期刊(网络版)CAJ-N》。

《中国兽医科学》第三届编辑委员会