中国兽医学报杂志

相思子毒素-a双抗体夹心ELISA法的建立和初步应用

关键词: mcab  elisa  检测  

应用流式细胞术检测脂肪肝综合征肉鸡肝细胞生长周期与凋亡

关键词: 脂肪肝综合征  高能低蛋白饲料  流式细胞术  细胞周期  细胞凋亡  肉鸡  

不同CO_2气腹压对山羊肝、肾功能的影响

关键词: 气腹压  山羊  肝功能  肾功能  

选择21只健康山羊随机均分为A、B、C 3组。分别用1.33、2.0、2.4kPa的气腹压值进行充气腹试验,以探讨不同CO2气腹压对山羊肝、肾功能的影响。结果表明:CO2气腹压可引起ALT、AST、ALP、Tbil、Crea升高和U-rea降低;在放气后1或2、3 d时,B、C 2组与A组相比较对肝、肾功能的影响差异显著;在放气后4d,A组肝、肾功能基本能恢复到气腹前水平,B、C 2组放...

代谢产物对体外培养新生犊牛肝细胞MTP mRNA表达的影响

关键词: 代谢产物  肝细胞  mtp  mrna表达  体外培养  犊牛  

硼对肉乌骨鸡铜中毒临床效应的影响

关键词: 硼  铜中毒  乌骨鸡  

选用560只1日龄肉用乌骨鸡,采用二因子多水平随机化试验设计研究日粮硼对铜中毒肉鸡的影响。试验中分别在玉米-豆粕型基础日粮中(Cu 50.9mg/kg,B 10.1mg/kg)添加549.1、749.1mg/kg的铜和49.1、109.1mg/kg的硼。观察各组雏鸡生产性能、临床表现及病理学变化。结果表明,硼对肉用乌骨鸡铜中毒具保护效应。

《兽医临床难病新解》简介

由兽医临床工作者廖斌发、廖启武编著的《兽医临床难病新解》一书已于近期由湖北科学技术出版社出版,面向全国公开发行。书中就当前流行或散发的猪瘟、疑似猪瘟、圆环病毒病、蓝耳病、伪狂犬病、链球菌病、水肿病、附红细胞体病、无名高热等病毒、细菌、原虫病以及其混合感染的温热病等100多个热门话题,运用中医模糊黑箱理论,通过病例,新解难病,...

胶体金试纸条半定量检测鸡蛋中磺胺嘧啶残留

关键词: 胶体金  试纸条  鸡蛋  磺胺嘧啶  

采用竞争反应模式建立了鸡蛋中磺胺嘧啶(SD)残留的胶体金试纸条半定量检测方法。该试纸条由吸样材料、玻璃纤维、硝酸纤维素膜、吸水材料组成。用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,胶体金标记SD单克隆抗体;SD竞争物包被于硝酸纤维素膜,制成胶体金试纸条。该试纸条在15min内可完成对SD残留的半定量检测,读条系统判定灵敏度为5μg/L,肉眼判定检测限为10μ...

固始鸡免疫器官内细胞增殖动态变化

关键词: 细胞增殖  流式细胞术  免疫器官  固始鸡  

应用流式细胞术研究了固始鸡免疫器官内细胞增殖的动态变化。结果表明:(1)固始鸡不同免疫器官内细胞均以G1期细胞为主,少量细胞为S期和M期,无异倍体细胞。不同免疫器官细胞周期动态变化相似,部分发育阶段之间存在差异。(2)不同发育阶段固始鸡免疫器官细胞增值指数由大到小依次是脾脏、法氏囊和胸腺;在8周龄(胸腺)、或12周龄(脾脏和法氏囊)以前,...

鸵鸟新城疫实验病理学研究

关键词: 鸵鸟  新城疫  实验病理学  

用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最...

水泡性口炎病毒感染犊牛口腔黏膜上皮细胞的超微结构变化

关键词: 水泡性口炎病毒  口腔黏膜上皮细胞  超微结构  犊牛  

将水泡性口炎病毒(VSV)接种于原代培养的犊牛口腔黏膜上皮细胞(CPMBCs),通过对不同时间收集的感染细胞制作超薄切片,观察病毒在该细胞上的形态发生。结果表明,VSV能导致CPMBCs出现典型的CPE和超微结构变化,主要表现为细胞圆缩、线粒体肿胀、胞浆空泡化,病毒游离于胞浆内或以出芽方式进入胞浆空泡内,病毒主要在细胞突起处进行出芽增殖,获得囊膜而...

钙信号转导与缺氧诱发肉鸡心肌细胞c-fos和c-myc基因表达的关系

关键词: 肉鸡腹水综合征  心肌细胞  钙信号  缺氧  异搏安  硝苯吡啶  环孢霉素a  

利用细胞培养、免疫组化、原位杂交、图像分析技术研究钙信号与缺氧诱发心肌细胞癌基因c-fos、c-myc表达的关系,进一步阐明钙信号转导与以右心肥大衰竭为特征的肉鸡腹水综合征(AS)的关系。结果显示,钙通道拮抗剂异搏安(V)、硝苯吡啶(N)、环孢霉素A(C)显著抑制缺氧引起的癌基因c-fos和c-myc mRNA的表达(c-fosmR-NA:常氧149.6±22.4;缺氧205.4±57.6...

血小板源性生长因子(PDGF-BB)促进山羊骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化

关键词: 骨髓间充质干细胞  血小板源性生长因子  平滑肌细胞  

将血小板源性生长因子(PDGF-BB)作用于骨髓间充质细胞,分别于5、7d后用抗α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)单克隆抗体进行免疫组化分析,定量RT-PCR检测α-SMA mRNA的表达,透射电镜观察细胞超微结构。免疫组化结果显示,PDGF-BB诱导组表达α-SMA的细胞数约为95%,而对照组表达α-SMA的细胞数约为5%。免疫组化图象分析结果显示,5、7d PDGF-BB诱导组抗α-SMA着色平...

猪囊尾蚴及其培养细胞的超微结构观察

关键词: 猪囊尾蚴  超微结构  透射电镜  扫描电镜  

应用透射电镜和扫描电镜观察了采自猪体的猪囊尾蚴及其体外培养细胞的形态结构特征。猪囊尾蚴的基本结构包括皮层、间质层和实质区。皮层密布微绒毛;内部是实质区,含光面内质网,大量囊泡和圆形空泡。线粒体多分布在基质区的近基膜处。皮层以基膜与间质分开。间质层为网状纤维样,并形成分支深入实质区,起支架作用。肌组织位于间质层中,间质层向内...

禽流感病毒H5N1亚型NS1蛋白在大肠杆菌中的高效表达和多克隆抗体的制备

关键词: 禽流感病毒  ns1蛋白  原核表达  蛋白印记  多克隆抗体  

克隆了NS1蛋白基因并构建了重组表达质粒pTIG-Trx-E-tag-NS1。该质粒在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导后获得了大量的可溶性表达蛋白,重组蛋白表达水平达到了细菌总蛋白的42.16%。经Anti-Etag进行Western blotting检测结果为阳性。后经金属螯和层析纯化获得纯度约为95%的蛋白样品,用纯化后的NS1蛋白直接作为抗原免疫家兔产生抗血清,经ELISA检测抗体效...

双重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌粘附素clfa A和Fnbp A基因

关键词: 金黄色葡萄球菌  粘附素  聚集因子  纤连蛋白  

利用设计合成的特异性引物对金黄色葡萄球菌进行PCR扩增,将目的基因回收并连接到T载体,鉴定后进行测序验证,然后对本实验室所分离鉴定的临床分离株进行双重PCR检测。结果显示,PCR产物经过电泳成像显示,仅有金黄色葡萄球菌分别在293bp和642bp处出现特异性条带。通过对金黄色葡萄球菌临床分离株双重PCR检测发现,其中95%以上存在粘附素基因clfa A和...

兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测

关键词: 兔  波氏杆菌  鉴定  16srrna  免疫  

2004年,山东省某一大型养兔场的20~30日龄幼兔突然大批发病死亡。病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、培养特性、生化特性、血清学反应特性等将分离菌鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。然后对所分离到的兔支气管败血波...

鸡传染性支气管炎病毒CK/CH/LDL05Ⅱ的分离鉴定及生物学特性

关键词: 鸡传染性支气管炎病毒  分离鉴定  核蛋白基因  

采取2005年大连某鸡场发病鸡群萎缩的输卵管进行处理,经鸡胚尿囊腔接种SPF鸡胚,分离到1株病毒。通过致SPF鸡胚病变特征、病毒对鸡外周血红细胞凝集特性、病毒粒子形态学特征、对SPF鸡致病性及死亡率等方面的研究,发现病毒经鸡胚传毒至第3代可致鸡胚生长发育障碍(侏儒胚)、胚体严重卷曲且大腿及尾部有点状出血;病毒囊液不凝集鸡的外周血红细胞;在...

鹅副黏病毒核酸探针检测方法的建立与应用

关键词: 鹅副黏病毒  地高辛标记探针  

根据GenBank中已发表的鹅副黏病毒F基因序列,设计合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致,约856bp的基因片段,回收并纯化此PCR产物。用随机引物法合成cDNA,地高辛标记,建立了地高辛标记探针检测鹅副黏病毒的方法。该探针能与鹅副黏病毒核酸发生特异性杂交,最低检出限量为3ng/L;而与H9N2亚型禽流感病毒、鹅细小病毒、大肠杆菌等核酸...

蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素(sBD-1)的序列分析及组织表达

关键词: 组织表达  基因克隆  绵羊  

从蒙古绵羊输卵管、子宫、子宫颈、阴道组织中提取总RNA,根据GenBank中羊的β-防御素的cDNA序列设计合成引物,通过RT-PCR进行cDNA扩增,获得了301bp的片段。将该片段克隆于pMD-18T载体后进行序列分析,确认该PCR产物为β-防御素。通过相同的RT-PCR反应体系和条件后,对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,以β-actin为参照,根据PCR产物的亮度推断不同组织中β-...

还原型谷胱甘肽对肉鸡生长及血清IGF-1水平、组织IGF-1 mRNA表达的影响

关键词: 肉鸡  生长  

9日龄黄羽雌性肉鸡1 000只随机分为A、B、C、D 4个组,每组设5个重复,每个重复50只。在A、B、C、D组的日粮中分别添加剂量为0、80、120、160mg/kg的还原型谷胱甘肽(GSH),饲养期84 d。观察GSH对肉鸡生长性能、血清类胰岛素生长因子1(IGF-1)、T3、T4水平以及组织IGF-1 mRNA表达的影响。结果表明,(1)添加GSH的鸡只血中GSH水平显著高于对照组(A组);(2...

日本血吸虫铁蛋白基因在油菜中的表达

关键词: 植物转基因疫苗  油菜  日本血吸虫铁蛋白  

根据GenBank日本血吸虫铁蛋白基因(SjFer)的序列设计1对特异性引物,利用PCR从cDNA文库中扩增SjFer基因,与T载体连接并测序。常规方法构建植物表达载体SjFer/pBI121,采用根癌农杆菌介导法转化油菜子叶,组织培养卡那霉素抗性筛选,获得转化植株。转化植株通过PCR和Northern-blot杂交进行鉴定。结果表明SjFer可在油菜中正确表达。该研究为进一步研究...

捻转血矛线虫ES24抗原基因的原核表达及其免疫诊断的应用

关键词: 捻转血矛纯虫  分泌排泄  原核表达  免疫诊断  

将ES24基因从pUC18-ES24重组质粒中亚克隆到pET-30a原核表达载体上,构建重组表达质粒pET-30a-ES24,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳和Western-blot分析表明,表达蛋白相对分子质量约为30 000,可被6×His抗体和捻转血矛线虫阳性血清所识别。纯化后的重组表达蛋白作为诊断抗原具有良好的免疫反应性和特异性,可用作免疫诊断试剂。

嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans减少绵羊粪便中线虫感染性幼虫剂量测定

关键词: 嗜线虫真菌  生物防治  胃肠道线虫病  剂量测定  

嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans是目前发现的一种最具有动物胃肠道线虫病生物防治应用潜力的真菌。为了解该菌捕杀绵羊粪便中感染性幼虫效果与剂量的关系,为今后该制剂应用和质量检验标准的制定提供依据,用不同剂量的厚垣孢子,分别以不经消化道直接加入感染羊粪便,或作添加剂通过饲喂进入消化道后采集直肠粪便,经培养检测感染性幼虫数量的变化...

绿色荧光蛋白在秀丽隐杆线虫中的表达

关键词: 秀丽隐杆线虫  启动子  电穿孔法  表达  功能  

为探讨增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因在秀丽隐杆线虫体内的异源表达,以及电穿孔技术在线虫基因转化中应用的可能性,根据秀丽隐杆线虫Act-1基因序列设计引物,以其基因组DNA为模板,进行PCR扩增,成功扩增出Act-1启动子。将PCR产物与pUCm-T载体连接后,转化至DH5α感受态细胞,筛选出阳性克隆并测序。pEG-FP-N1真核表达载体经双酶切去掉CMV启动子序列,...

用PCR与ELISA、RPLA对照检测乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素和毒素休克综合征毒素-1

关键词: 乳腺炎  金黄色葡萄球菌  肠毒素  

用PCR方法对14个奶牛场分离得到的临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌(金葡菌)124株,隐性乳腺炎金葡菌213株,山羊临床型乳腺炎金葡菌12株进行超抗原毒素sea,seb,sec,sed.see和tst基因的分子调查,结果表明:奶牛标本肠毒素基因和tst基因的阳性率为27.42%,隐性乳腺炎为1.41%,山羊标本为33.3%。奶牛标本产生毒素的类型以SEA,TSST-1和SEC为主,山羊标本产生肠...

猪圆环病毒2型抗体检测间接ELISA方法的建立

关键词: 猪圆环病毒2型  间接elisa  重组蛋白  

用纯化的重组猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化(如抗原的包被、血清及酶标二抗作用时间、底物的选择等),建立了检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法。结果显示,重组抗原最适包被浓度为0.5mg/L,最适包被条件为4℃过夜,血清稀释度1∶160,酶标二抗工作浓度1∶7500,待检测血清和酶标二抗的...

猪圆环病毒2型ORF2基因原核表达蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用

关键词: 猪圆环病毒2型  原核表达  间接elisa  应用  

对含有已构建的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因原核表达质粒pET-ORF2s的BL21菌进行诱导表达,纯化重组蛋白包涵体,Western-blot检测纯化蛋白,将其作为抗原包被酶标板,优化间接ELISA试验条件,建立可检测PCV2血清抗体的间接ELISA方法。用该方法对吉林省多个种猪场收集的179份血清样品进行检测,总阳性率为42.5%。由此说明,本试验建立的PCV2血清抗体间...

鹅副黏病毒胶体金检测卡的研究

关键词: 鹅副黏病毒  单克隆抗体  免疫层析检测卡  胶体金  

将制备的抗鹅副黏病毒(GPMV)JG04株单克隆抗体3A5标记胶体金颗粒,提纯的鸡IgG(抗JG04株GPMV)喷涂在NC膜上,建立检测GPMV的快速夹心胶体金免疫层析检测卡(ICS)。该检测卡检测鸡减蛋综合征病毒、传染性法氏囊炎病毒、传染性支气管炎病毒、小鹅瘟病毒鸡胚或鸭胚尿囊液和麻疹病毒、犬瘟热病毒细胞培养物呈阴性,与鹅副黏病毒、孔雀源新城疫毒株,鸽源...

间接免疫荧光染色检测石蜡切片中的鸭病毒性肠炎病毒和抗原定位

关键词: 间接免疫荧光  石蜡切片  鸭病毒性肠炎病毒  检测  抗原定位  

差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化鸭病毒性肠炎病毒(DEV)免疫兔制备兔抗DEV高免血清后,用DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化的兔抗DEVIgG建立了间接免疫荧光染色法(IFA)检测石蜡切片中DEV的方法。IFA的最佳条件为:石蜡切片用10mmol/L pH6.0的柠檬酸缓冲液为微波修复液微波修复10min,胰酶修复20min;10%小牛血清室温封闭30min;加入1∶25的兔抗DEVIgG于4...