鸡IL-18成熟蛋白基因变构体毕赤酵母表达载体的构建及表达

刘一尘; 张春杰; 程安春; 程相朝; 汪铭书; 李银聚; 吴庭才; 易明林 河南科技大学动物科技学院; 河南洛阳471003; 四川农业大学动物科技学院; 四川雅安625014; 河南省农作物新品种重点实验室; 河南郑州450002

关键词:定点突变 毕赤酵母表达系统 

摘要:为使鸡IL-18成熟蛋白基因在真核系统中高效表达,对其进行定点突变,将酵母低频密码子突变为偏嗜性密码子,构建了鸡IL-18成熟蛋白变构基因真核重组表达载体pPICZαA-MChIL18*,并将其转化入P.pastoris X-33。重组菌株X-33/pPICZαA-MChIL18*经甲醇诱导后,表达产物的上清液经SDS-PAGE检测,结果在约23000处有目的条带,与预期的相对分子质量一致,占总蛋白的45%,对其进行Western-blot检测,结果与兔抗鸡IL-18多克隆抗体发生特异性免疫反应。结果表明,鸡IL-18成熟蛋白变构基因在毕赤酵母中成功的进行了表达。

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