关键词：组织工程皮肤 壳多糖 基底膜构建 培养基 钙浓度 

摘要：目的寻找最适于组织工程皮肤生长及基底膜构建的体外培养基钙浓度。方法按照鲁元刚等建立的方法制备复方壳多糖组织工程皮肤，根据培养基钙浓度不同，分为1．00、1．45、1．65和1．95mmol／L四组。在37℃、5％CO2及90％以上湿度孵箱内浸没培养3d后，将培养物置于不锈钢筛网上进行气一液界面三维培养，每天换液1次。培养7、15d，行HE、PAS染色观察组织工程皮肤的组织学特性；并利用免疫组织化学染色对基底膜的主要成分——Ⅳ型胶原进行观察，评价基底膜构建情况。结果各组组织工程皮肤组织学观察类似正常皮肤，有分化良好的表皮和致密真皮，但1．95mmol／L组表皮分化较其他组更好；1．00、1．45及1．65mmol／L组角化层外侧常伴未角化的角质形成细胞，1．95mmol／L组表皮细胞角化完全，且与颗粒层细胞结合牢固。PAS染色显示各组真、表皮间有紫红色带状结构；免疫组织化学染色显示真皮与表皮间Ⅳ型胶原反应呈阳性，且1．95mmol／L组阳性反应强于1．00mmol／L组。结论钙浓度为1．95mmol／L的培养基最适合于复方壳多糖组织工程皮肤生长及基底膜构建。

中国修复重建外科杂志要求:

{1}注释和参考文献应分别著录。注释用于对文中特殊内容作解释说明，设为当页脚注；参考文献用于标明引文出处，列于正文之后，勿用脚注或尾注。

{2}本刊拒绝一稿多投，严禁剽窃、抄袭行为，一经发现，将进行追责。

{3}标题不超过15个汉字（可加副标题）。

{4}摘要须用第三人称写法，去掉废话、套话、空话，慎用结论性、定义性的字词和语句。中文摘要一般不宜超过200～300字，外文摘要不宜超过250个实词。

{5}引言是学术论文的开场白，主要说明为什么要进行该项研究工作，提出文章中要研究的问题，引导读者阅读和理解全文。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社