关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型病毒株 检测方法 

摘要：为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的快速鉴别检测方法，本研究针对PRRSV美洲型经典株、变异株及弱毒活疫苗TJM-F92株的基因序列差异，设计了2对特异性引物和3条TaqMan探针，经过反应条件的优化，建立了能够同时检测并区分PRRSV美洲型经典株、变异株及TJM-F92疫苗株的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果显示，该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点，与猪其他常见病毒无交叉反应；经典株、变异株、TJM-F92疫苗株重组质粒标准品的检出下限均为2.68拷贝/μL，比常规PCR敏感100倍；组内及组间重复试验的变异系数均小于1.5 %。此外，该方法对324份疑似PPRSV感染的临床样品进行检测，结果显示PRRSV阳性114份，其中美洲型变异株105份、经典株6份、TJM-F92疫苗株3份，变异株和经典株混合感染4份。本研究建立的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法可以为PRRSV美洲型野毒株、疫苗株的快速鉴别检测及流行病学调查提供有效的技术手段。

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