牛支原体及其脂质相关膜蛋白诱导胎牛肺细胞IL-1β表达的分子机制研究

刘素丽 李媛 周玉梅 高利萍 邵佳日 王琪 陈莹 辛九庆 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室 黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院 吉林长春130118 东北农业大学资源与环境学院 黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院 黑龙江哈尔滨150030

关键词:牛支原体 脂质相关膜蛋白 胎牛肺细胞 

摘要:为研究牛支原体(M.bo vis)及其脂质相关膜蛋白(LAMPs)诱导胎牛肺(EBL)细胞IL-1β表达的分子机制,本研究首先以M.bo vis及其LAMPs刺激EBL细胞,利用荧光定量PCR检测细胞因子IL-1β的动态变化;然后将融合表达的细胞p65 (RelA)蛋白和绿色荧光蛋白重组质粒pEGFP-p65转染EBL细胞,以LAMPs刺激EBL细胞,通过激光共聚焦观察p65的亚细胞分布.荧光定量PCR结果显示,M.bovis及其LAMPs能够诱导EBL细胞IL-1β的表达;而且LAMPs作用的最佳剂量为2μg/mL,最佳时间为12 h.同时,激光共聚焦试验检测到LAMPs能够诱导p65进入EBL细胞核中.上述实验结果表明LAMPs能够诱导EBL细胞中p65进入细胞核内,从而激活NF-κB信号通路,诱导IL-1β上调表达.

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