关键词：碱性成纤维细胞生长因子 骨髓间充质干细胞 温敏性壳聚糖 腺病毒 椎间盘退变 

摘要：目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（b FGF）和转化生长因子-β1（TGF-β1）复合骨髓间充质干细胞（BMSCs）以温敏性壳聚糖（TCH）为载体对大鼠退变椎间盘的修复作用。方法针刺法建立SD大鼠椎间盘退变模型,4周后核磁共振下观察退变效果。体外培养BMSCs,并用含增强型绿色荧光蛋白的腺病毒转染使带有增强型绿色荧光蛋白基因,作荧光标记。将椎间盘退变的SD大鼠分成4组,实验组A组使用b FGF＋TGF-β1＋BMSCs＋TCH凝胶移植入退变的椎间盘中,B组和C组分别使用BMSCs＋TCH凝胶和b FGF＋TGF-β1＋TCH凝胶,对照组D组使用PBS缓冲液。继续培养4周后核磁共振观察各组椎间盘的修复情况。HE、Masson染色、组织病理学观察各组椎间盘结构。逆转录PCR,Western blot检测各组髓核蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、Sox-9、Ⅰ型胶原的表达。结果移植注射的BMSCs能在椎间盘中生长,呈类髓核分化。核磁共振结果显示：A组髓核信号明显高于其他3组,B组高于C组,D组髓核信号最低,硬脊膜受压,脊髓呈串珠状改变,各组间Pfirrmann分级结果差异有统计学意义（P〈0.05）。HE、Masson染色显示：A组椎间盘结构完整,髓核细胞数量优于其他3组,髓核和纤维环界限清楚,B组髓核数量多于C组,B组纤维环未见断裂,而C组可见断裂的纤维环,D组髓核细胞被杂乱的纤维组织取代。逆转录PCR、Western blot显示：A组蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、Sox-9的表达最高,B组优于C组,D组表达最低（P〈0.05）。而Ⅰ型胶原的表达在4组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论移植的BMSCs在退变椎间盘中能够存活,呈类髓核分化。b FGF＋TGF-β1＋BMSCs＋TCH凝胶复合体对退变的椎间盘具有明显修复作用。BMSCs＋TCH凝胶治疗退变椎间盘的效果优于b FGF＋TGF-β1＋TCH凝胶但低于b FGF＋TGF-β1＋BMSCs＋TCH凝胶复合体。

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