关键词:地塞米松 骨髓间充质干细胞 成骨分化 骨质疏松症
摘要:目的 探讨miR-155对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化能力的影响。方法 从C57/BL6J小鼠骨髓中分离BMSCs,BMSCs按照2×105个/m L的浓度接种,过夜贴壁后进行转染,通过miR-155模拟剂及mi R-155抑制剂改变miR-155在BMSCs中的表达,同时设立mi RNA模拟剂的同型对照和miRNA抑制剂的同型对照。采用q RT-PCR检测不同处理后BMSCs中骨标志基因RUNX2、骨钙蛋白(OCN)、骨桥蛋白和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)的表达;通过碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性分析观察ALP的表达和酶活性;通过茜素红染色检测细胞外钙盐结节的形成。结果 地塞米松使miR-155在BMSCs中的表达上调(13.56±0.45)倍(P〈0.01),miR-155在BMSCs向成骨细胞诱导第4天时表达显著下调(P〈0.01)。转染miR-155模拟剂的BMSCs成骨诱导第12天时RUNX2、OCN和Col-Ⅰ的表达明显低于其同型对照(P〈0.01),ALP活性明显低于其同型对照(P〈0.01),ALP染色和茜素红染色的阳性细胞数也明显少于其同型对照。转染miR-155抑制剂的BMSCs成骨诱导第12天时RUNX2、OCN和Col-Ⅰ的表达明显高于其同型对照(P〈0.05或P〈0.01),ALP活性明显高于其同型对照,ALP染色和茜素红染色的阳性细胞数也明显多于其同型对照。结论 转染miR-155模拟剂能够明显抑制BMSCs向成骨细胞分化,转染miR-155抑制剂则能够明显促进BMSCs分化为成骨细胞。miR-155作为成骨分化的负性调节分子可能成为骨质疏松症等成骨分化异常相关疾病的有效干预靶点。
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