关键词：早期记忆t细胞 

摘要：目的：探讨γc家族细胞因子对体外培养T细胞表型的影响,为过继免疫治疗体外细胞制备提供实验依据。方法：采用健康人外周静脉血单个核细胞（PBMC）,应用尼龙毛柱法、CD3磁珠阳性分选法、CD3磁珠阴性分选法和自然沉降法等4种方法分选T细胞,比较各种方法获取的T细胞纯度、回收率和细胞增殖。用CD3/CD28免疫磁珠激活CD3＋T细胞,γc家族细胞因子分为IL-2组和IL-7、IL-15、IL-21混合组,比较两组T细胞扩增倍数和表型的差异。结果：CD3磁珠阴性分选的T细胞纯度显著高于尼龙毛柱分选、CD3磁珠阳性分选、自然沉降分选[（94.06±1.07）%vs（86.74±1.06）%、（89.61±1.40）%、（88.48±1.86）%,P〈0.05],自然沉降分选的T细胞回收率显著高于其余3种分选法[（60.29±1.53）%vs（45.03±2.79）%、（20.15±3.41）%、（42.98±2.82）%,P〈0.05）,综合比较效果以自然沉降法为最优选择。IL-2组T细胞扩增倍数显著高于混合组[（262.6±143.2）vs（73.0±25.8）倍,P〈0.05]。混合组的早期记忆T细胞占总T细胞的比例、Tscm和T_scm-like、Tcm所占比例均显著高于IL-2组[（55.6±1.82）%vs（39.6±1.52）%,（16.6±1.82）%vs（9.8±1.30）%,（39.0±1.58）%vs（29.2±1.79）%;均P〈0.05]。结论：自然沉降法从PBMC中分选T细胞具有低成本、高纯度、高回收率的优势。IL-7、IL-15和IL-21混合培养有利于早期记忆T细胞的生成,为肿瘤过继免疫治疗的体外细胞制备提供了实验依据。

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