中华肝脏病杂志

RNA干扰技术用于肝病治疗的研究

关键词: 基因治疗  肝病  rna干扰技术  抗病毒性肝炎  核苷类药物  抗病毒治疗  干扰素  人类基因组计划  

近年来,病毒性肝炎的治疗研究有了长足的进展,特别是干扰素和抗病毒核苷类药物不断有新的发现,但其疗效仍有不尽人意之处.随着人类基因组计划的完成,基因治疗的领域不断拓展,抗病毒性肝炎及相关肝病的基因治疗研究又有了相应的发展,其中RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术的出现为病毒性肝炎抗病毒治疗研究提供了新的选择.

《中华肝脏病杂志》投稿注意事项

载体法筛选乙型肝炎病毒S基因小干扰RNA靶位体系的建立

关键词: 小干扰rna  靶位  hbv  乙型肝炎病毒s基因  融合表达载体  筛选  抑制作用  egfp  融合蛋白  增强型绿色荧光蛋白  

目的构建4个针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因序列的小发夹RNA(shRNA)表达载体,作用于增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和HBV S基因融合表达载体,观察shRNA对融合蛋白的抑制作用,筛选出有效靶位.方法利用pAVU6+27质粒,设计并构建4个shRNA表达载体,与融合表达载体共转染AD293细胞,荧光显微镜下观察融合蛋白的荧光表达情况并通过流式细胞仪分析shRNA对融合蛋白...

RNA干扰技术用于抗乙型肝炎病毒的实验研究

关键词: hbv  抗乙型肝炎病毒  rna干扰技术  转染  培养上清液  表达载体  小干扰rna  转录  重组质粒  

目的构建针对乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和核心抗原的小干扰RNA(siRNA)表达载体pSuper C,观察其对HepG2 2.2.1 5细胞(简称2.2.1 5细胞)中HBV DNA转录和翻译相应蛋白的影响.方法根据RNA干扰(RNAi)作用原理设计针对HBV核心区的相应序列,再将其克隆入含聚合酶ⅢH1-RNA启动子的真核表达载体pSuper,将此重组质粒以电转染法转入2.2.15细胞中,用酶联...

RNA干扰抑制乙型肝炎病毒复制的实验研究

关键词: rna干扰  hbv  乙型肝炎病毒  表达  质粒载体  抑制  实验研究  小干扰rna  转录  复制  

目的以乙型肝炎病毒(HBV)核心区为靶位,构建表达小干扰RNA(siRNA)的质粒载体pSilencer3.1-Hlhygro,体外观察siRNA抗HBV的效果.方法以HepG2 2.2.15细胞为靶细胞,利用脂质体Metafectene与表达siRNA的质粒载体pSilencer3.1-Hlhygro共转染,用定量聚合酶链反应检测细胞上清液中DNA,用逆转录聚合酶链反应检测HBV C-mRNA.结果成功构建了表达siRNA的转录...

抗结缔组织生长因子小干扰RNA对肝星状细胞合成分泌细胞外基质的影响

关键词: ctgf  hsc  胞外基质  肝星状细胞  结缔组织生长因子  透明质酸  小干扰rna  原基  基因表达水平  

目的研究化学合成抗结缔组织生长因子(CTGF)小干扰RNA(siRNA)对肝星状细胞(HSC)CTGF基因表达及合成分泌细胞外基质(ECM)的影响.方法将化学合成抗CTGF siRNA以Oligofectamine包裹,转染HSC T6细胞,设空白对照,抽提孵育24、48、72 h细胞总RNA及蛋白质,并收集培养上清液,应用western blot和(或)逆转录聚合酶链反应检测HSC T6细胞CTGF及I、Ⅲ型胶原基...

端粒酶逆转录酶小干扰RNA对肝癌细胞的体外抑制作用

关键词: 肝癌细胞  小干扰rna  人端粒酶逆转录酶  靶向  htert基因  蛋白表达  转染  细胞增殖  逆转录聚合酶链反应  

目的研究靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)的小干扰RNA(siRNA)在肝癌细胞SMMC7721中抗肿瘤作用.方法针对hTERT基因编码区及非编码区,采用T7转录系统在体外合成了2条siRNA,转染SMMC 772l细胞.以四甲基偶氮唑盐试验、逆转录聚合酶链反应及western blot观察其对SMMC-772l细胞增殖、hTERT mRNA及蛋白表达的影响.结果2条siRNA以剂量依赖性方式抑制了SMMC-...

中华医学会“2004全国消化系统疾病学术会议”会议通知

人肝再生增强因子小干扰RNA表达质粒的构建和鉴定

关键词: 肝再生增强因子  表达质粒  hepg2细胞  观察  小干扰rna  免疫细胞化学法  alr  基因编码区  转染  构建  

目的检测人肝癌细胞株HepG2细胞有无人肝再生增强因子(hALR)的表达,构建针对人肝再生增强因子基因编码区的小干扰RNA(siRNA)表达质粒pSIALR-A及其阴性对照质粒pSIALR-B,观察其对人肝再生增强因子表达的影响.方法用免疫细胞化学法观察HepG2细胞表达hALR的情况.将构建成功的pSIALR-A和pSIALR-B分别转染HepG2细胞,转染后48 h,用免疫细胞化学法及逆...

肿瘤坏死因子-α基因多态性与乙型肝炎病毒宫内感染易感性的关系

关键词: 宫内感染  hbv  易感性  对照组  乙型肝炎病毒  单核苷酸多态性  位点  等位基因频率  

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因-23 8位点G/A单核苷酸多态性与乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染易感性的关系.方法应用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测HBV标志物阳性母亲所生4 5例HBV宫内感染儿童(I组)、8 5例宫内未感染儿童(Ⅱ组)和l 26例对照组儿童TNF-α基因-23 8位点G/A单核苷酸多态性.结果HBV宫内感染组TNF-α基因-23 8位点A等位基因频率显著...

乙型肝炎病毒抗原与金属硫蛋白相互作用的研究

关键词: 抗原  hbv  乙型肝炎病毒  金属硫蛋白  肝细胞  体外  免疫共沉淀  酵母双杂交系统  相互作用  蛋白编码基因  

目的为探讨乙型肝炎病毒(HBV)抗原在乙型肝炎发病机制中的作用,寻找防治HBV感染的有效方法,筛选并克隆人肝细胞中与HBV抗原相互作用的蛋白基因.方法应用酵母双杂交系统3构建HBV抗原诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其中表达,与含肝文库质粒的酵母Y187进行配合、双杂交,在营养缺陷培养基(SD/Trp-Leu-His-Ade)上及X-α gal蓝白斑双重筛选与肝细胞蛋...

肝移植治疗原发性胆汁性肝硬化的疗效分析

关键词: 肝移植  患者  pbc  生存率  治疗  原发性胆汁性肝硬化  生存时间  

目的观察原发性胆汁性肝硬化(P B C)患者和移植肝的实际生存时间,肝移植后死亡的原因及肝移植后的复发率.方法根据QLTS的数据库中的随访资料,回顾性分析5 2例共接受5 4次肝移植的PBC患者.52例PBC肝移植患者中,平均年龄(5 3.2±6.7)岁,平均随访时间是(55.4±11.3)个月.分析术前的临床特征、移植后生存情况和死亡原因,采用欧洲模式计算未接受肝移植...

医学信息杂志投稿征订通知

肺炎衣原体感染与原发性胆汁性肝硬化的相关性研究

关键词: cp  pbc  抗c  对照组  phc  正常  血清  

目的通过检测原发性胆汁性肝硬化(PB C)患者血清中抗肺炎衣原体(CP)IgG、IgM水平,探讨CP感染与PBC之间的相关性.方法采用CP酶联免疫固相吸附试验检测4l例PBC患者(PBC组)、70例肝炎后肝硬化(疾病对照组,PHC组)和5 7名健康查体者(正常对照组)血清抗CP IgG、IgM抗体水平.结果PBC组和PHC组的抗CP IgG平均水平(RU/m1)较正常对照组高(46.8±43.4、49.5±...

暴发性肝衰竭中Toll样受体2表达的实验研究

关键词: tlr2  表达  肝组织  暴发性肝衰竭  正常小鼠  rna  蛋白  

目的分析D-氨基半乳糖(D-Gal)/脂多糖(LPS)诱导的暴发性肝衰竭模型中肝组织Toll样受体2(TLR2)的表达变化及与细胞因子白细胞介素-l8(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)表达的关系,探讨TLR2在启动炎性应答而致肝损伤中的作用.方法BALB/C小鼠腹内联合注射D-Gal 900 mg/kg与LPS l0 μg/kg后观察其存活率,并检测不同时间点血清转氨酶和血...

丙型肝炎病毒5＇端非编码区和NS3蛋白酶共调控外分泌性碱性磷酸酶表达细胞模型的建立及意义

关键词: hcv  ns3蛋白酶  表达  细胞模型  分泌性  丙型肝炎病毒  碱性磷酸酶  靶位点  调控  重组质粒  

目的构建丙型肝炎病毒5′端非编码区(HCV 5′NCR)和NS3丝氨酸蛋白酶共调控外分泌性碱性磷酸酶(SEAP)表达细胞模型,并分析其用于抗HCV药物筛选和评价的可行性.方法用聚合酶链反应技术扩增HCV 5′NCR和NS3/4段,定向克隆至表达质粒pSEAP2-Control的SEAP基因上游,构建含HCV 5′NCR-NS3/4A-SEAP嵌合基因的重组表达质粒pNCR-NS3/4A-SEAP.将重组质粒转...

RNA干扰抗肝炎病毒治疗的希望与发展方向

关键词: 治疗  肝炎病毒  rna干扰  细胞内  观察  细胞基因  作用  双链rna  核酸酶  同源序列  

RNA干扰(RNAi)是由小双链RNA有效地作用于同源RNA序列,经细胞内核酸酶作用使同源序列降解的过程.虽然最初的研究是观察其对细胞基因的下调作用,近来的一些研究表明RNAi在抗肝炎病毒等人类和动物病毒中也同样有效,所以RNAi有可能发展成为一个新的抗肝炎病毒治疗的方法.

RNA干扰在肝癌中的应用

关键词: 肝癌  临床应用  rna干扰  治疗中  癌症基因  展示  研究热点  

近年来,RNA干扰(RNAi)技术已成为癌症基因治疗中令人关注的研究热点,以其高效、特异、应用广泛的特点,展示了诱人的临床应用前景. RNAi是内源性或外源性双链RNA诱发的mRNA水平上的基因沉默机制.RNAi技术有3个重要的特点,首先它具有高效性.从刚开始的21～23 nt的小干扰RNA(siRNA)分子,到后来研究应用的27～29nt的小发夹RNA(shRNA)分子,RNAi都具有...

RNA干扰在基因表达调控研究中的应用

关键词: 蛋白结构  表达水平  基因表达调控  细胞  医学研究  rna干扰  功能基因组学  生物学功能  

在功能基因组学研究中,阐明各种蛋白的结构和生物学功能是其核心任务,这不仅是生物学的主要研究方向,而且也是医学研究的主要内容,毕竟细胞的功能和表型是由细胞中的蛋白来主导的,许多疾病都是蛋白结构与功能、表达水平与调节的异常引起的.研究蛋白的功能,常常通过改变蛋白的表达水平,观察细胞的生物学特性的变化来实现.这种研究策略包括强制性...

三磷酸腺苷生物发光法检测肝癌组织细胞对化疗药物敏感性的研究

关键词: 肝癌组织  化疗药物敏感性  细胞  生物发光法  肝癌患者  检测  

采用三磷酸腺苷(ATP)生物发光法检测26例肝癌患者肝癌组织细胞对化疗药物的敏感性,现报道如下. 一、资料与方法 1.研究对象:(1)病例资料:收集2001年9月～2003年5月在中山市人民医院手术的肝癌患者肝癌组织标本,共26例,均为原发性肝癌.病理诊断:肝细胞癌25例、肝细胞胆管细胞混合癌1例.其中男21例,女5例,平均48.9岁,术前无化疗.

树突状细胞与肥大细胞瘤细胞融合后诱导T细胞介导的抗肿瘤效应

关键词: 肥大细胞  树突状细胞  瘤细胞  抗肿瘤效应  t细胞  介导  诱导  融合  dc  机制  

该研究利用聚乙二醇将相同来源的树突状细胞(DC)与小鼠的肥大细胞瘤系P815融合在一起,形成治疗性DC瘤苗,并对这种树突状细胞瘤苗免疫小鼠后抑制肿瘤生长的作用及其机制进行初步探讨.

缬沙坦对肝星状细胞的增殖及胶原合成的影响

关键词: 缬沙坦  胶原合成  肝星状细胞  增殖  ras  肾素血管紧张素系统  可能机制  细胞内钙浓度  

对受体生物学功能及肾素-血管紧张素系统(RAS)的研究发现,RAS的主要介质血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)可诱导纤维化而与其血液动力调节作用无关.研究以肝星状细胞(HSC)系HSC-T6细胞为主要实验对象,探索缬沙坦对AngⅡ引起的HSC-T6细胞的增殖、细胞内钙浓度及胶原合成影响,从而在体外探讨缬沙坦抗肝纤维化的可能机制.

白细胞介素-10、血小板衍生生长因子-BB对肝星状细胞表达表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的影响

关键词: 肝星状细胞  表达  碱性成纤维细胞生长因子  表皮生长因子  rna  纤维化  

研究拟通过观察外源性血小板衍生生长因子(PDGF)-BB和白细胞介素-10(IL-10)干预对肝星状细胞(HSC)表达表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA的变化,进一步探讨PDGF-BB及IL-10在纤维化发生中的作用及其机制.

DNA芯片技术检测乙型肝炎病毒及丁型肝炎病毒的初步研究

关键词: 丁型肝炎病毒  乙型肝炎病毒  dna芯片技术  初步研究  hbv  rd  限制性显示  基因芯片  引物  

现分别针对乙型肝炎病毒(HBV)、丁型肝炎病毒(HDV)基因保守区域设计多对聚合酶链反应(PCR)引物,打印制备成芯片,并用限制性显示(RD)技术标记样品,探索此方法制备基因芯片的可行性.

人参皂甙Rh2对人肝癌细胞SMMC-7721信号传导的影响

关键词: 人参皂甙  人肝癌细胞株  gr  信号传导  诱导  分化过程  体型  

人参具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、增强免疫力等多种生物学活性.人参皂甙是人参中主要的活性有效成分.我们曾发现人参总皂甙在体外能诱导人肝癌细胞株HepG2分化[1,2],最近又发现人参皂甙单体Rh2(G-Rh2)对人肝癌细胞株SMMC-7721有诱导分化作用.G-Rh2诱导SMMC-7721细胞分化过程中,癌细胞的信号传导系统必然会发生改变.通过研究G-Rh2对糖皮质激素受...

肝癌中乙型肝炎病毒整合位点的分离鉴定

关键词: 肝癌  hbv  乙型肝炎病毒  癌发生  hcc  肝细胞癌  分子机制  整合位点  基因文库  快速分离  

乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染是导致肝癌发生的重要原因.HBV整合是致癌的可能机制之一.传统上,HBV整合位点的鉴定主要通过反复的筛选肝细胞癌(HCC)基因文库获得.现报道一种快速分离鉴定HBV整合位点的新方法,为探讨肝癌发生的分子机制提供新的研究手段.

核因子κB和环氧化酶-2在酒精性肝病大鼠模型中的表达

关键词: 酒精性肝病  表达  大鼠模型  转录因子  调控  靶基因  

核因子κ B(NF-κB)是参与细胞凋亡与增殖调控的重要转录因子,环氧化酶-2(COX-2)是其靶基因之一.COX-2参与肝脏疾病的物质代谢紊乱及炎症纤维化过程.现旨在观察NF-κB与COX-2在酒精性肝病(ALD)中的表达,探索其在ALD发病过程中的作用.

热休克蛋白gp96在原发性肝癌组织中的检测及其意义

关键词: 癌组织中  原发性肝癌  热休克蛋白gp96  肿瘤  免疫组织化学方法  免疫治疗  免疫反应  

热休克蛋白gp96的发现为肿瘤和病毒性肝炎等传染性疾病的免疫治疗开辟了新的途径.用免疫组织化学方法对gp96在原发性肝癌组织中的表达进行检测,探讨gp96在抗肝癌免疫反应中的作用.

抗结核药物致肝损害172例临床分析

关键词: 抗结核药物  肝损害  dll  临床分析  

现对172例抗结核药物致肝损害(DLL)总结如下. 一、资料与方法 1.一般资料:172例DLL来自1464例结核住院患者,男129例,女43例.年龄19～76岁,＜20岁1例,20～60岁121例,＞60岁50例.体重＜50kg者65例,＞50kg者107例.吸烟52例,嗜酒48例.有肝炎病史或入院时乙、丙型肝炎病毒标志物阳性者31例,其中HBV M(+)21例,抗-HCV(+)10例.

2004年美国肝病学会关于肝硬化腹水治疗的推荐意见

关键词: 治疗  肝病学  肝硬化腹水  门诊患者  新出现  腹腔穿刺术  住院  推荐意见  美国  

一、腹腔穿刺指征 1.住院或门诊患者有新出现明显的腹水体征需要进行腹腔穿刺术并保存腹水.属证据分级Ⅱ3级. 2.因为出血的可能性很小,所以不推荐在腹腔穿刺术之前预防性应用新鲜冰冻血浆或血小板.属证据分级Ⅲ级.

解偶联蛋白2与非酒精性脂肪肝

关键词: 解偶联蛋白2  nafld  非酒精性脂肪肝  非酒精性脂肪性肝病  单纯性脂肪肝  肝纤维化  脂肪性肝炎  独特作用  

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)包括单纯性脂肪肝及脂肪性肝炎,后者可以进展为肝纤维化和肝硬化,其发病机制尚不十分清楚.解偶联蛋白2(uncoupling protein-2,UCP2)由于其在NAFLD中的独特作用而日益受到学者的重视.现就UCP2在非酒精性脂肪性肝病中发生的可能作用作一综述.

DNA传感器研究进展及应用前景

关键词: 人类基因组计划  毒理研究  灵敏  研究进展  医学诊断  药物筛选  卫生防疫  dna传感器  生物分析  功能基因组  

随着结构基因组与功能基因组研究不断深入,特别是人类基因组计划的完成,大大推动了对基因的研究.基因的分离及分析在卫生防疫、医学诊断、药物筛选以及毒理研究等环境科学领域发挥着越来越重要的作用.众多的新兴生物技术,为发展高灵敏、高特异的实用型生物分析检测注入了活力.DNA传感器就是一种全新的思路和尝试,与传统的检测技术相比,传感器具...