人骨肉瘤细胞系HOS肿瘤干细胞样细胞亚群的分离与鉴定

刘爱国 白宁 张显 陈朝辉 郭庆功 河南大学第一附属医院骨科 河南开封475000 河南大学淮河医院消化内科 河南开封475000

关键词:培养基 无血清 肿瘤干细胞 骨肉瘤 hos 

摘要:目的探索无血清培养基培养人骨肉瘤细胞系HOS细胞,筛选并鉴定人骨肉瘤细胞系HOS中肿瘤干细胞相关亚群。方法通过无血清悬浮培养初步富集骨肉瘤细HOS肿瘤干细胞,观察其形成肿瘤干细胞球过程中的细胞形态,并在有血清培养基中诱导其分化。各种浓度化疗药物顺铂(CDDP)和阿霉素(DxR)分别处理HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞,MTT法检测两种细胞对化疗药敏感性。Real.timePCR检测HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞干细胞相关基因ABCG2、Bmil、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3表达情况。将HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞分别接种于BALB/c裸鼠,观察成瘤情况。结果人骨肉瘤细胞系HOS细胞能够在无血清培养基中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球。HOS悬浮细胞球对于化疗药物的敏感性较HOS贴壁细胞高。Real-timePCR结果显示HOS悬浮细胞球较HOS贴壁细胞高表达肿瘤干细胞相关基因ABCG2、Broil、Nanog、Oct3/4、Sox10、SLT3。HOS悬浮细胞球体内成瘤能力较HOS贴壁细胞强。结论无血清悬浮培养可以初步富集人骨肉瘤细胞系HOS悬浮细胞球,且这些细胞具有肿瘤干细胞特性。

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