关键词：肝炎病毒 乙型 基因表达 病毒复制 rna干扰 

摘要：目的以乙型肝炎病毒(HBV)S基因区为靶位,构建表达siRNA的质粒载体pSilencer3.1-H1hygro,体外观察siRNA抗HBV的效果.方法以HepG2.2.15细胞为靶细胞,利用脂质体Metafectene转染表达siRNA的质粒载体pSilencer3.1-H1hygro于细胞中,用时间分辨免疫荧光分析法(IFMA法)检测细胞上清中HBsAg和HBeAg,用定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测细胞上清DNA,用逆转录(RT)-PCR检测HBV mRNA.结果成功构建了表达siRNA的转录质粒载体,siRNA可抑制HBV的抗原表达和病毒复制,1、2、4 μg siRNA对HBsAg的抑制率分别为75%、82%、89%;对HBeAg的抑制率分别为32%、38%、43%;对HBV DNA的抑制率分别为30%、43%、49%;对HBV RNA的抑制率分别为30%、70%、90%.结论靶向HBV S区的siRNA能抑制HBV的抗原表达和复制;siRNA抑制作用呈剂量依赖性和序列特异性.

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