关键词:骨形成蛋白质类 腺病毒科 糖尿病 2型
摘要:目的构建骨形态发生蛋白9(BMP9)基因腺病毒表达载体及稳定产毒细胞系,为观察其对T2DM糖、脂代谢异常的干预效应奠定基础。方法质粒pCMV/BMP9双酶切克隆至腺病毒载体Ad5.F,构建重组腺病毒表达载体Ad5.BMP9.F,酶切测序鉴定;转包装细胞,经抗性筛选检测病毒滴度,挑选滴度较高的稳定产毒细胞克隆进行逆转录PCR(RT-PCR)鉴定。结果建立BMP9基因腺病毒表达载体Ad5.BMP9.F经酶切及测序证实目的基因插入位点及读码框架正确;建立稳定产毒细胞克隆最高病毒滴度达7.4×10^5 CFU/mL,RT-PCR证实BMP9基因整合其中并稳定表达。结论成功构建含BMP9基因的腺病毒表达载体及其稳定产毒细胞系。
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