PCR-DGGE法分析不同产地蝉花真菌多样性

刘腾飞; 史晓飒; 张洪梅; 张艳聪; 刘自尧; 刘元元; 史新元 北京中医药大学中药学院; 北京100029; 兰州理工大学; 甘肃兰州730050

关键词:蝉花 真菌多样性 18s rdna 

摘要:目的:采用PCR-DGGE的方法对安徽、江苏、四川、广西等10个产地蝉花的真菌多样性进行分析,以期获得蝉花优势寄生真菌。方法:通过提取样品总DNA,采用真菌通用引物NS1、Fung扩增18S rDNA,将PCR产物DGGE电泳后,对16个差异性条带进行了切胶回收、克隆测序以及BLAST数据库比对验证;对不同产地蝉花的电泳图谱进行了相似度以及多样性指数分析。结果:广西玉林产地蝉花的条带数最多为16条,H=2.679;四川北川、四川绵阳、广东河源3个产地的蝉花真菌多样性相似度较高。结论:克隆测序结果表明共有条带3和9代表的真菌为不同产地蝉花的优势寄生真菌蛹虫草Cordyceps militaris;除了3种未获得纯培养的节担菌纲和真核细胞外,其余的为Eurotium athecium、Magicicada cassini、Myrothecium roridum、Aspergillus penicillioides等菌。

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