关键词：基因表达 蛋白纯化 

摘要：以pcDNA3．1-IL18为模板进行PCR扩增获得猪白细胞介素-18（IL-18）的成熟肽基因，以KpnⅠ、SacⅠ双酶切PCR产物作为供体，KpnⅠ、SacⅠ双酶切的pET41c和pET32c作为载体，连接载体供体，转化DH5a，经双酶切、PCR鉴定及测序筛选出阳性重组质粒，并命名为pET41c—IL18和pET32c—IL18。将pET41c—IL18和pET32c-IL18转化大肠埃希氏菌BL21（DE3），用1mmol／LIPTG37℃诱导表达。SDS-PAGE及Western—blotting分析结果表明，所表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在，pET32c-IL18重组蛋白分子质量约33ku，与预期大小相符。将包涵体提取物用8mol／L脲变性，经Ni-NTA柱纯化，透析复性，得到了纯化的IL-18蛋白。

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